花叶玉簪(Hosta undulata Bailey)别名波叶玉簪,属百合科玉簪属多年生宿根草本植物。株高20~40厘米,叶基生,丛状,叶片长卵形,叶缘微波状,浓绿色,叶面中部有乳黄色和白色纵纹及斑块。在大型园林绿地之中常做带状或条状应用于林带及行道树下层,其叶片硕大,色彩斑驳,耐低温,近年来种苗需求量较大,常规繁殖方法为分蘖繁殖,因繁殖速度慢且极易发生变异,近年来我们通过组织培养方法培育出大量种苗并炼苗成活,已规模栽植并有成效,现总结如下:
一、外植体选取,采集
春季4、5月份,晴天上午9时左右,选取目标组培品种花叶玉簪多年生大株丛周围新萌生的外围单株苗,剥开周围的土壤, 露出其根部,用小铁铲带根部铲出分蘖株幼苗备用。
二、外植体清洗,消毒
将采集回的苗株清理干净泥土和杂物后,剪去下部须根,保留基部2-3公分长芽鳞,去除叶柄,先用5%左右的洗洁精浸泡2-3分钟,后在自来水下流水冲洗1小时左右。在无菌台内用75%的酒精消毒30 秒,无菌水冲洗3遍后用1%的次氯酸钠消毒15分钟,无菌水冲洗3遍,剥去外侧的苞片,用0.5%的次氯酸钠再消毒5分钟,无菌水冲洗3遍,将外植体剥去中间部分的叶柄,基部组织露出腋芽生长点,置入制备好的培养基之中,暗培养一星期,温度控制在20-22℃。
三、诱导培养基筛选
(1)MS 6-BA5.0 NAA0.2
(2)MS 6-BA3.0 NAA0.2
(3)MS 6-BA2.0 NAA0.2
(4)MS 6-BA5.0 NAA0.1
(5)MS 6-BA3.0 NAA0.1
(6)MS 6-BA2.0 NAA0.1
每组合10瓶,每瓶2株,培养26天。去除污染,分别统计汇总,记录正常保存的无菌芽苗数如下:
序号 | 培养基 类 别 | 接种数 | 污染数 | 40天留存 数 | 60天留存 数 | 备 注 |
1 | (1) | 15 | 1 | 10 | 8 | 1芽/瓶 |
2 | (2) | 15 | 1 | 13 | 12 |
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3 | (3) | 14 | 2 | 10 | 7 |
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4 | (4) | 16 | 1 | 11 | 8 |
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5 | (5) | 12 | 1 | 9 | 6 |
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6 | (6) | 13 | 2 | 10 | 5 |
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由上表可以看出,在同等培养条件下,相同消毒措施,不同激素处理的外植体材料,(2号)培养基组合是最适宜的花叶玉簪花梗腋芽无菌培养诱导培养基。
四、增殖培养
对于花叶玉簪已有的无菌苗,在无菌台上分别接转入增殖培养基进行筛选试验。(参照已有相关玉簪组织培养繁育技术文献)
(7)MS 6-BA2.0 NAA0.1
(8)MS 6-BA2.0 NAA0.2
(9)MS 6-BA1.5 NAA0.1
(10)MS 6-BA1.5 NAA0.2
(11)MS 6-BA1.0 NAA0.1
(12)MS 6-BA1.0 NAA0.2
移入培养室,光照度1000Lux.时间12小时/天,温度25 -1℃,培养36天观察统计增殖情况(转接统计时增殖苗0.5cm一下的芽不予统计, 单位:瓶、株、倍)
序号 | 接种数 | 污染数 | 增殖数量 | 生长状况 | 增殖率 | 备注 | |
7 | 30 | 4 | 26 | 46 | 良好 | 1.7 | 2芽/瓶 |
8 | 26 | 2 | 24 | 51 | 良好 | 2.1 |
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9 | 30 | 2 | 26 | 72 | 良好 | 2.6 |
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10 | 28 | 4 | 24 | 57 | 良好 | 2.4 |
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11 | 32 | 3 | 29 | 121 | 良好 | 4.2 |
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12 | 24 | 2 | 22 | 85 | 良好 | 3.9 |
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由上表可以看出,剔除污染,各配比类型培养基均有良好的增殖效果,其中(11)号培养基激素配比增殖效果最高,可达到4.2%。
五、生根培养
增殖培养后即可转入生根培养基,适宜花叶玉簪生根培养基组成为1/3MS 0.2mg/LNAA.转入生根后,培养条件光照1000-1200Lux,光照时数10-12小时/天,经45天左右须根长2-3cm时即可移入温室驯化炼苗。
六、炼苗移栽
生根瓶苗在炼苗温室防止5-7天后,逐步增加光照至4000-6000Lux,经试验对比适合花叶玉簪炼苗的基质为椰糠:国产泥炭:腐熟园土:细沙=3:2:1:1(体积比)
方法:消毒处理后的炼苗基质装入10*10的硬塑盆,将瓶苗夹出,去除培养基并清洗消毒,视瓶苗大小状况分单株或双珠栽入备好的基质之中,喷水淋透并常规化温室管护,待10-15天后每盆平均有1-2片新叶长出时即可移至室外背荫处或树荫下,进行自然生长管护。
作者:周建峰
陕西省苗木繁育中心